تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) واختبار الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي

Posted on
مؤلف: Virginia Floyd
تاريخ الخلق: 7 أغسطس 2021
تاريخ التحديث: 13 شهر نوفمبر 2024
Anonim
PCR TEST -  فهم تحليل (بي سر أر) واستخداماته فى تشخيص الأمراض والطب الشرعي  والأيحاث الجينية
فيديو: PCR TEST - فهم تحليل (بي سر أر) واستخداماته فى تشخيص الأمراض والطب الشرعي والأيحاث الجينية

المحتوى

تحليل تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) هو تقنية معملية. الغرض من اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل هو العثور على كميات صغيرة من الحمض النووي في عينة باستخدام عملية تعرف باسم تضخيم. أثناء تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل ، يتم نسخ الحمض النووي موضع الاهتمام بشكل متكرر حتى يتوفر ما يكفي منه للتحليل والكشف. على سبيل المثال ، يمكن استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل للتعرف على كميات صغيرة من الحمض النووي من الكائنات الحية التي تسبب السيلان أو الكلاميديا ​​الموجودة في عينة البول.

كيف يعمل PCR؟

الخطوة الأولى في PCR هي الإنشاء الاشعال. هذه سلاسل قصيرة من الحمض النووي تتطابق مع نهايات عينة الحمض النووي التي تحاول اكتشافها. إنها الحيلة للعثور على جزء معين من الحمض النووي وتضخيمه واكتشافه. يمكن استخدام تلك القطعة من الحمض النووي لتحديد العامل الممرض. يمكن استخدامه أيضًا للقيام بأشياء مثل اكتشاف الجينات لمقاومة المضادات الحيوية.

بمجرد حصولك على البرايمر ، فإن الخطوة التالية في تفاعل البوليميراز المتسلسل هي تسخين العينة بحيث ينفصل الحمض النووي المزدوج الشريطة إلى خيطين منفردان - وهذا ما يسمى تمسخ. ثم البرايمرمع عينة الحمض النووي. بعد هذا ، الحمض النووي بوليميراز يستخدم لبدء تكرار الحمض النووي في موقع التمهيدي. أخيرًا ، يتم تسخين الحمض النووي لفصل الخيوط مرة أخرى. مع ذلك ، تبدأ عملية PCR بأكملها مرة أخرى.


تزداد كمية جزء الحمض النووي موضع الاهتمام الموجود في العينة بشكل كبير مع كل دورة PCR. في الدورة الأولى ، تصبح النسخة الواحدة نسختين. ثم تصبح نسختان أربع ، ثم تصبح ثماني ، إلخ. هذا النمو الأسي يعني أنه ، بشكل عام ، هناك حاجة إلى 20 إلى 40 دورة فقط لتحديد ما إذا كان الحمض النووي المعني موجودًا. (إذا كان الحمض النووي موجودًا ، فإن 20-40 دورة كافية أيضًا لتوفير عينة كافية للتحليل).

كل خطوات تفاعل البلمرة المتسلسل - تغيير طبيعة الحمض النووي ، وتطبيق البادئات ، وإطالة الحمض النووي - تحدث عند درجات حرارة مختلفة. هذا يعني أنه بعد وضع الخليط الأولي معًا ، يمكن التحكم في الخطوات من خلال عملية تعرف باسم التدوير الحراري. يعني التدوير الحراري أن درجة الحرارة يتم الاحتفاظ بها عند المستويات الضرورية لفترة كافية فقط لحدوث كل خطوة. وبالتالي ، يعد تفاعل البوليميراز المتسلسل طريقة فعالة لتضخيم كمية الحمض النووي المستهدف. في الواقع ، يمكن إنجازه في أنبوب اختبار واحد مع القليل من الحاجة للتدخل البشري.


مثّل تفاعل البوليميراز المتسلسل ثورة في التقنية البيولوجية عندما تم تطويره لأول مرة في أوائل الثمانينيات. فاز مبتكر PCR ، كاري موليس ، بجائزة نوبل في الكيمياء عن عمله في عام 1993.

لماذا يعتبر تفاعل البوليميراز المتسلسل مرتبطًا باختبار الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي

تفاعل البلمرة المتسلسل ، والتقنيات ذات الصلة مثل تفاعل سلسلة ligase، تثبت أنها ذات أهمية متزايدة لاختبارات الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي ، وذلك لأن هذه التقنيات يمكن أن تحدد بشكل مباشر كميات صغيرة من الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي الفيروسي في العينات. لا يتطلب تحديد الشفرة الجينية لمسببات الأمراض أن يكون العامل الممرض على قيد الحياة ، على عكس الثقافة البكتيرية أو الثقافة الفيروسية. كما أنه لا يتطلب أن تكون العدوى قد حدثت منذ فترة طويلة بما يكفي حتى يتمكن الأشخاص من تطوير تفاعل الأجسام المضادة القابل للاكتشاف (الطريقة التي يتم بها اكتشاف العدوى بواسطة ELISA.) وهذا يعني أن تقنيات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) يمكنها أحيانًا اكتشاف الأمراض في وقت أبكر من الاختبارات الأخرى. والأفضل من ذلك ، يمكن اكتشاف الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي دون الحاجة إلى القلق بشأن إبقاء العينات حية أو الاختبار في الوقت المناسب تمامًا.


أفضل اختبارات الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي في المنزل